MS-PCR法重新评估血管紧张素原基因M235T多态性与家庭性原发性高血压的相关性

　　MS-PCR法重新评估血管紧张素原基因M235T多态性与家庭性原发性高血压的相关性
 
　　南京医科大学第一附属医院江苏省人民医院心研所心内科210029
 
　　耿茜 杨笛 张寄南 马文珠
 
　　目的 应用MS PCR法检测血管紧张素原(AgT)基因M235T多态性与家族性原发性高血压的相关性，并与传统的PCR RFLP法进行比较。
 
　　方法 (1)采集外周血细胞提取基因组DNA，建立PCR RFLP最佳反应体系；利用3个引物建立MSPCR扩增体系；同一标本分别以两种方法对比。(2)具高血压家族史者94例，无家族史者36例，2组中血压正常者和高血压患者分别是62、32、26、10例，所有标本采用MS　　　　PCR法扩增。
 
　　结果 (1)PCRRFLP最佳实验条件为0.075靏基因组DNA扩增的PCR产物/30Unit.Tth111 I酶，扩增产物长度为163bp,如存在变异位点则可被Tth111 I酶切成长度为140bp的条带。(2)应用MSPCR法检测AgT基因型，如为M等位基因纯合型(235MM)电泳示一条156bp的扩增片断；T等位基因纯合型(235TT)则示一134bp条带；M235T杂合型(235MT)则同时具有156bp和134bp两条片断。(3)10个标本分别以MSPCR和PCRRFLP法检测，内切酶消化者基因型均为MT，而MS PCR法仅1例为MT型，余9例均为TT型(90%)，DNA测序结果证实为TT型。(4)具有高血压家族史的原发性高血压患者组(FH组)、具家族史的非高血压者(FNH组)、无家族史的正常对照组(N组)和无家族史的高血压患者组(NFH组)AgT基因TT型频率分别为0.581、0.563、0.346和0.4，T等位基因频率分别为0.766、0.7656、0.577和0.55。